دراسة تلوين إنزيم البيروكسيداز يعزز تشخيص أمراض الدم
January 9, 2026
تلوين بيروكسيداز الميالو (MPO)، المعروف أيضًا باسم تلوين بيروكسيداز الكريات البيض (POX)، هو طريقة تلوين كيميائية خلوية مستخدمة على نطاق واسع. تستخدم هذه التقنية في المقام الأول لتلوين خلايا نخاع العظم ومسحات الدم، وتكتشف نشاط البيروكسيداز داخل الخلايا للمساعدة في تشخيص اضطرابات الدم، وخاصة في تصنيف اللوكيميا.
يعتمد تلوين MPO على التفاعل التحفيزي للبيروكسيداز داخل الخلايا. يقوم هذا الإنزيم بتكسير الأكاسيد لإنتاج الأكسجين، والذي يتفاعل بعد ذلك مع يوديد البوتاسيوم لتكوين اليود. يتحد اليود مع صبغة Wright-Giemsa، مما يخلق حبيبات ملونة في السيتوبلازم تكشف عن توزيع البيروكسيداز تحت المجهر. تظهر أنواع الخلايا المختلفة محتوى وتوزيعًا مختلفًا للبيروكسيداز، مما يسمح لتلوين MPO بالتمييز بينها.
يتطلب تلوين MPO القياسي مجموعات كواشف متخصصة لضمان الدقة والموثوقية. تحتوي المجموعة النموذجية على:
- المحلول أ: محلول الأيوسين - صبغة حمضية تلطخ السيتوبلازم باللون الأحمر أو الوردي
- المحلول ب: أزرق II - صبغة أساسية تلطخ النوى باللون الأزرق أو الأرجواني
- المحلول ج: محلول منظم فوسفات ملحي من يوديد البوتاسيوم - يحتوي على ركيزة تفاعل البيروكسيداز ويحافظ على استقرار الأس الهيدروجيني
- المحلول د: صبغة Wright-Giemsa - صبغة مزدوجة الغرض تعزز مورفولوجيا الخلايا
تتوفر المجموعات بأحجام مختلفة (تكوينات 5 اختبارات و 20 اختبارًا و 100 اختبار) لاستيعاب احتياجات المختبرات المختلفة.
- تحضير المحلول العامل: اخلط المحلول ج مع المحلول د (عادةً نسبة 1.0 مل: 250 ميكرولتر). استخدمه في غضون ساعتين.
- تثبيت المسحة: قم بتثبيت مسحات نخاع العظم أو الدم المحضرة بالميثانول أو الإيثانول لمدة 5-10 دقائق.
- التلوين: اغمر المسحات المثبتة في المحلول العامل لمدة 5-10 دقائق، مع التحكم في درجة الحرارة والرطوبة.
- الشطف: اغسل بلطف بالماء المقطر أو محلول منظم فوسفات ملحي لإزالة الصبغة الزائدة.
- التلوين المضاد (اختياري): استخدم الهيماتوكسيلين لتعزيز تباين النواة.
- التجفيف: جفف بالهواء أو استخدم مجفف الشعر.
- المجهر: افحص المسحات الملطخة لتقييم نشاط البيروكسيداز وتوزيعه.
يتطلب تفسير النتائج خبرة متخصصة. تشمل النتائج الشائعة:
- رد فعل إيجابي: حبيبات سيتوبلازمية بنية محمرة إلى زرقاء داكنة (إيجابية ضعيفة مقابل قوية). قد تغطي الحبيبات السيتوبلازم بأكمله أو تحجب النواة.
- رد فعل سلبي: سيتوبلازم أزرق بدون حبيبات ونوى أرجوانية حمراء موحدة.
- الخلايا الحمضية: تظهر تلطيخًا أزرق داكنًا مكثفًا، وأحيانًا مع بلورات تشبه الإبرة خارج الخلية.
- تصنيف اللوكيميا: يميز اللوكيميا النخاعية (إيجابية MPO) عن اللوكيميا الليمفاوية (سلبية MPO)، مما يوجه قرارات العلاج.
- تشخيص اللوكيميا النخاعية الحادة (AML): يؤكد الأصل النخاعي ويساعد في تحديد الأنواع الفرعية، مع معدلات إيجابية مختلفة تشير إلى أنواع فرعية مختلفة من AML.
- تقييم متلازمة خلل التنسج النقوي (MDS): يقيم نضوج الخلايا وتمايزها، مع أنماط MPO غير الطبيعية التي تشير إلى MDS.
- اضطرابات الدم الأخرى: مفيد في تشخيص اللوكيميا النخاعية المزمنة وتليف النخاع.
- جودة الكواشف وظروف التخزين
- الالتزام الصارم بالبروتوكول
- إعداد المسحة المناسب
- مدة التلوين المثلى
- التقييم المجهري الخبير من قبل علماء الأمراض
تستمر التطورات التكنولوجية في تعزيز تلوين MPO. يجمع الكيمياء المناعية الآن بين MPO وعلامات المناعة لتحقيق دقة أكبر، بينما يتيح قياس التدفق الخلوي الكشف الكمي لـ MPO. بينما تتطور هذه الطريقة الكيميائية الخلوية الكلاسيكية، فإنها تعد بتقديم مساهمات أكبر في تشخيص وعلاج أمراض الدم.